Pourquoi l’ARCTURUS XT ?
La vitesse de travail d’un échantillon de tissu pour l’analyse de l’expression de gènes utilisant les techniques de microarrays et de QRT-PCR est critique et nécessite l’utilisation d’un outil puissant. Une plateforme flexible est nécessaire pour augmenter la vitesse, et conserver la qualité des ARNs et des protéines. Un nouvel appareil automatique de microdissection laser (de quatrième génération), permet de capturer un groupe de cellules homogène ou de plus grandes quantités encore grâce à deux techniques de microdissection (UV ou IR) : l’ARCTURUS XT.
L’ARCTURUS XT permet de faire de la découpe UV (par Photo-dégradation) et de la capture par LCM avec le laser IR.
Grâce aux lasers utilisés et à l’automatisation, l’Arcturus XT est 8 à 10 fois plus rapide que les technologies alternatives. Il inclut la possibilité de travailler en Fluorescence, en DIC, en contraste de phase et de créer des procédures multiples en fonctions des applications et des utilisateurs (Sauvegarde de préférences). Il permet de calculer précisément la quantité de microdissécat récupéré afin de standardiser les protocoles d’extraction des biomolécules.
Lorsque l’on combine l’utilisation de l’Arcturus XT avec la gamme de réactifs de microgénomique d’Arcturus, une grande spécificité est atteinte dans la quantification différentielle de l’expression de gène comparativement aux approches traditionnelles.
2 Présentation technique de l’Arcturus XT :
2.1 Présentation de l’instrument :
Cette technologie est protégée par un brevet américain N° US Patent 7075640 portant sur le principe de collecte des échantillons sur des « capsules » permettant de contrôler parfaitement toutes les étapes de la microdissection et une forte réduction du volume du tampon de lyse.
Arcturus XT, la vitesse et la flexibilité en Microdissection
Le système est basé sur un microscope inversé Nikon TIE évolutif :
• Il Combine la technique LCM et la découpe à l’UV (Diodes IR et UV).
• Ecran tactile et pilotage de la platine par trackball.
• Interface utilisateur simplifiée
• Configurations enregistrables
• Système totalement automatisé
• Possibilité d’isoler jusqu’à 4 types cellulaires à partir d’une même lame.
• Système de fluorescence par fibre optique
• Platine motorisée trois lames
• Système de détection automatique des cellules d’intérêt (enregistrement de différents profils de criblage).
• Flexibilité : Possibilité de travailler en culture cellulaire, DIC, contraste de phase
• Module culture cellulaire
• Un support SAV et un support technique spécialisé.
2.2 Ses particularité
- Le système ARCTURUS XT possède deux types de lasers pour deux approches très différentes de la Microdissection : Un laser à Diode UV, permettant une très grande rapidité de microdissection (Plusieurs dizaines de milliers de cellules en quelques secondes seulement), découpe de tissus végétaux, de tissus de plus de 100 µm d’épaisseur et un laser Infra Rouge (IR) à diode permettant de maintenir parfaitement l’intégrité des biomolécules (ARN « Qualité Puces »). Ces deux lasers sont extrêmement précis et augmentent le champ d’applications possible dans le domaine de la microdissection laser.
- L’interface graphique du logiciel améliore encore la rapidité et facilité d’utilisation, même pour un utilisateur occasionnel, tout en offrant des fonctionnalités très évoluées pour un utilisateur averti.
- L’ARCTURUS XT est équipé des dernières technologies lasers à diode aussi bien pour l’UV que pour l’IR. Ceci permet une rapidité de découpe et une précision à l’objectif x20 inégalée à ce jour. (Taille du laser UV < 1 µm à l’objectif x 10 ). Il dispose d’un jeu d’objectif comprenant : 2X, 10X, 40X
- L’ ARCTURUS XT possède une caméra couleur analogique (Caméra Numérique disponible en Option), permettant d’obtenir une image de très haute qualité de la région vidéo active.
- Grâce à son diffuseur de lumière spécialement développé pour les technologies de microdissection laser, l’ARCTURUS XT permet d’obtenir en temps réel une balance des couleurs et avoir accès à une qualité équivalente à une lame montée avec lamelle, même pendant la phase de microdissection laser.
- Il permet de traiter jusqu’à 3 lames dans une seule et même session, grâce à sa platine trois lames. Ceci permet de concentrer les microdissécats en un temps record dans un même tube afin de diminuer le phénomène de dilution dans le tampon de lyse. De travailler sur des lames dites « sériées » afin de pouvoir microdisséquer sur des coupes non colorées.
- Il est possible de collecter jusqu’à 4 types de cellules différentes dans la même session. Dans le cas de microdissection de cellules rares, l’Arcturus XT possède un logiciel de reconnaissance paramétrable permettant de scanner la ou les lames à grande vitesse et de repérer puis microdisséquer les cellules d’intérêt.
- L’ ARCTURUS XT est un appareil qui vous assure un transfert dynamique et sûr du microdisséquat sur le support de lyse, la membrane. Il est même possible de visualiser cette membrane avec les différents fragments microdisséqués.
- Le système ARCTURUS XT et la large gamme de réactifs pour la microgénomique sont idéals pour de très grandes variétés d’applications :
- Oncologie
- Biologie du développement,
- Neuroscience
- Structures sub-cellulaires (Chromosomes, etc)
- Application pour les cellules vivantes
- Protéomique
- Tissus durs (Os, peau, cartilage…)
- Criminologie
- Botanique
- …
- Le système de microdissection ARCTURUS XT est un système évolutif dans le temps. Il est possible d’y ajouter l’observation en contraste de phase, en DIC. Il est possible également d’évoluer vers des applications en culture cellulaire et d’utiliser le système comme un microscope.
- La construction et l’assemblage de l’ARCTURUS XT répondent à l’ensemble des classes mondiales recommandant des exigences de qualité et de reproductibilité.
2.3 Principe de fonctionnement et d’utilisation
Vous avez la possibilité de charger trois lames en même temps sur l’instrument (de natures différentes en fonction des applications). Il est possible de récupérer jusqu’à quatre groupes de cellules différentes.
Vous avez alors accès à une interface graphique très conviviale.
Flexibilité et Automatisation :
Compatibilité avec tout type de lames et de membranes
Automatisation de l’Optique
Changement des Objectifs motorisés
Focus manuel ou automatique
Variation de l’intensité lumineuse
Stockage de régions successives d’intérêts
Accès au paramétrage de la caméra
Lentille 1.5 permettant d’augmenter le grossissement
pour tous les objectifs sans réduction de la qualité des
images.
Des Outils de Microdissection simples et flexibles
Possibilité d’utiliser simultanément le laser UV et IR
Possibilité de n’utiliser que l’UV ou l’IR
La fonction ablation permet de détruire grâce au laser UV des cellules potentiellement contaminantes soit sur la coupe de tissu initiale ou bien au niveau du microdissécat lui-même.
